炭疽杆菌双毒力因子荧光PCR检测方法的建立及应用

作者：熊炜; 孙思扬; 韩伟; 李深伟; 薛蓓蕾; 田桢干^*

来源：中国动物检疫, 2023, 40(02): 107-111.

• 炭疽杆菌
• 荧光PCR方法
• Taq Man探针
• 双重

由炭疽杆菌（Bacillus anthracis）引起的炭疽（anthrax）是严重危害人类和家畜健康的重大传染病。为了提高出入境口岸对不明粉未快件样品的查验效率，防范通过包裹夹带生化武器，本研究使用Taq Man探针技术，建立了针对炭疽杆菌两种毒力质粒pOX1和pOX2的双重荧光PCR检测方法，并对该方法的特异性、灵敏性和稳定性进行了试验。结果显示：本研究建立的炭疽杆菌双重荧光PCR检测方法具有较强的特异性，只特异性检出炭疽杆菌pOX1和pOX2，而与金黄色葡萄球菌等19种对照病原菌均无交叉反应；灵敏度与单重荧光PCR方法相近，最低检测限可达10 copies/μL；稳定性好，反应体系低温保存2、4、6、8个月后，检测阳性质粒的Ct值和峰值相差不大。应用该方法检测600份猪牛羊组织样本，均未检出炭疽杆菌阳性核酸。本研究建立的双重荧光PCR检测方法为炭疽杆菌的快速检测提供了技术支撑。