细胞有丝分裂前期检查点过表达对鼻咽癌5-8F细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用及机制研究

作者：陈武兵; 王艺龙; 应永杰; 陶宝鸿; 蔡志毅

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科, 2023, 30(04): 241-265.

DOI：10.16066/j.1672-7002.2023.04.010

• 鼻咽癌
• 细胞凋亡
• 免疫组织化学
• 裸鼠
• 移植瘤
• 细胞有丝分裂前期检查点

目的 探究细胞有丝分裂前期检查点（checkpoint with forkhead-associated and ring finge,CHFR）对鼻咽癌（NPC）5-8F细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用，并探究可能的机制。方法 将重组慢病毒LV-CHFR及空载体慢病毒-绿色荧光蛋白质粒（LV-GFP）作为阴性对照导入5-8F细胞中，构建LV-CHFR/5-8F重组细胞，激光共聚焦显微镜观察细胞感染效率；将裸鼠随机分为3组（每组5只）：空白对照组（接种0.2 ml未感染病毒的5-8F细胞悬液）、阴性对照组（接种0.2 ml稳转株LV-GFP/5-8F细胞悬液）、过表达CHFR组（接种0.2 ml稳转株LV-CHFR/5-8F细胞悬液），并绘制肿瘤生长曲线图；免疫组化法检测瘤体组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Polo样激酶1(polo like kinase 1,PLK1)蛋白表达情况；原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测各组瘤体组织中细胞凋亡情况；免疫印迹法检测各组瘤体组织中PLK1、CHFR、细胞周期素B(CyclinB1)、细胞周期蛋白（CyclinB1）、周期蛋白依赖性激酶2(CDC2)蛋白表达。结果 随处理时间（9、12、15、18、21 d）延长，过表达CHFR组各时间点裸鼠瘤体体积均小于空白对照组、阴性对照组（F=7.872、5.778、6.717、70.020、11.782,P=0.007、0.011、0.010、0.001）。免疫组化检测显示，在空白对照组、阴性对照组裸鼠移植瘤组织中PLK1呈强阳性，在过表达CHFR组中，裸鼠移植瘤组织中PLK1表达呈弱阳性。与空白对照组、阴性对照组比较，过表达CHFR组移植瘤细胞凋亡率升高（P<0.005）。与空白对照组、阴性对照组比较，过表达CHFR组移植瘤细胞凋亡率升高（F=355.256,P=0.000）。与空白对照组、阴性对照组比较，过表达CHFR组移植瘤组织中PLK1、Cyclin B1、CDC2蛋白水平均降低（F=5.201、2.0304、129.946,P=0.024、0.142、0.000）,CHFR蛋白水平升高（F=38.919,P=0.000）。结论 过表达CHFR对NPC 5-8F细胞裸鼠移植瘤生长有一定抑制作用，可能与抑制PLK1通路活化有关。

• 单位
  台州市立医院