和田羊抗苦马豆素抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：王帅; 陈根元; 贾琦珍; 胡建军

来源：塔里木大学学报, 2015, 27(04): 25-31.

• 苦马豆素
• 抗苦马豆素抗体
• ELISA检测

建立特异性强、敏感性高的和田羊血清抗苦马豆素(Swainsonine,SW)抗体ELISA检测方法。利用自行制备的人工抗原SW-BSA(牛血清白蛋白)免疫接种和田羊,获得SW抗血清后以间接ELISA法检测血清抗体效价,通过分析包被抗原种类、浓度,血清稀释度等指标对检测数据的影响,选择最适条件,确定检测方法。试验表明,以质量浓度为10μg/m L的SW-卵清蛋白(OVA)偶联抗原作为包被抗原,4℃下包被过夜,质量浓度为20 g/L的明胶封闭,酶标二抗的最佳稀释比为1/1 600,试验条件为37℃温育1 h;样品血清最佳稀释比为1/80,试验条件为37℃温育2 h,底物最佳显色时间为30 min。建立的抗SW抗体ELISA检测方法,特异性强、稳定性高,为进一步研究SW人工抗原的免疫原性等奠定了基础。

• 单位
  新疆生产建设兵团; 塔里木大学; 动物科学学院