摘要
目的 观察复方苦参汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中炎症因子及自噬水平的影响,并探讨其作用机制。方法 将20只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、复方苦参汤组、美沙拉嗪组,每组5只。适应性喂养7 d后,除正常组外,其余3组予以3%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d制备UC小鼠模型。同时在造模第1天开始,正常组和模型组每日均以质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,复方苦参汤组与美沙拉嗪组分别予复方苦参汤(7.28 g/kg)、美沙拉嗪(0.52 g/kg)灌胃,每日1次,连续灌胃7 d。每天记录小鼠体质量、大便性状及便血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分。末次灌胃结束后,取各组小鼠结肠组织,测量结肠长度,肉眼观察肠黏膜炎症损伤程度进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分。采用苏木精-伊红染色(HE)法观察结肠组织病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)含量;免疫印迹(Western blot)法及实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测自噬相关分子蛋白及mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠DAI评分、CMDI评分、促炎因子IL-1β和IL-18,以及泛素结合蛋白P62(P62)分子表达升高(P<0.05),结肠长度缩短(P<0.05),而抑炎因子白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)的表达下降(P<0.05),Bcl-2同源结构域(Beclin1)蛋白、微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)蛋白和其mRNA的表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,复方苦参汤组与美沙拉嗪组的DAI评分、CMDI评分、促炎因子IL-1β和IL-18,以及P62分子均表达降低(P<0.05),结肠长度显著增加(P<0.05),而抑炎因子IL-4和IL-10,以及Beclin1、LC3的表达水平明显升高(P<0.05)。与美沙拉嗪组比较,复方苦参汤组的CMDI评分增加(P<0.05),IL-1β、IL-18及P62的表达均升高(P<0.05),而IL-4、IL-10,Beclin1、LC3的表达降低(P<0.05),同时结肠长度以及DAI评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论 复方苦参汤可通过促进肠组织自噬的表达,减轻UC结肠炎症反应及病理损伤。
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院; 华中科技大学