pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒构建及其小鼠精子表达

作者：李茜; 王培林; 王亮; 张喆; 郑征

来源：青岛大学医学院学报, 2010, (05): 395-398.

• 绿色荧光蛋白质类
• 质粒
• 肝炎病毒
• 乙型
• 精子
• 转染
• 小鼠 green fluorescent proteins
• plasmids
• hepatitis B virus
• sperm
• transfection
• mice

目的构建绿色荧光蛋白(GFP)与乙型肝炎病毒(HBV)preS1基因的重组真核表达载体并观察其在小鼠精子内的表达。方法采用PCR方法 ,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBVpreS1基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到含有GFP的真核表达载体pcDNA3.1-GFP,经酶切及测序鉴定后,用脂质体介导法转染小鼠精子,在荧光显微镜下观察并应用PCR技术检测HBVpreS1基因的存在与表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1-preS1-GFP真核表达载体,将其转染小鼠精子后,在荧光显微镜下观察到转染精子头部有绿色荧光,PCR扩增得到位于HBVpreS1基因区域内长约589bp的片段。结论重组...

• 单位
  中国科学院; 青岛大学