重组质粒pcDNA3/sIL-1R(Ⅰ)转染牙龈成纤维细胞的瞬时表达检测

作者：徐艳; 章锦才; 张蕴惠; 刘怡

来源：广东牙病防治, 2004, (04): 243-245+321.

• 人可溶性白细胞介素-1受体
• 人牙龈成纤维细胞
• 体外转染

目的　检测以sIL 1R胞外成熟肽编码区基因作为目的基因构建的重组质粒pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达量 ,为pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )导入动物牙龈组织提供依据。方法　人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代 ,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染。ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞的表达产物进行含量检测。结果　sIL 1R(Ⅰ )在基因转染 2 4h内开始表达 ,72h最高 ,转染组细胞培养液和细胞冻融液中sIL 1R表达量均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,1周后表达逐渐减弱 ,2周后仍有少量表达。结论　通过脂质体介导的基因转染方法 ,重组质粒pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )在人牙龈成纤维细胞系中具有表达功能 ,并且其胞外及胞内均具有特异性表达产物

• 单位
  广东省口腔医院; 首都医科大学; 四川大学华西口腔医院; 南京医科大学