摘要

目的研究核糖核酸(RNA)干扰血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)对原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移及血管生成的影响。方法从新生儿脐带中提取原代HUVECs。将细胞分为3组:空白组、阴性对照组和实验组。空白组细胞不做任何处理,阴性对照组加入100 nmol·L-1人与小鼠基因无同源性的小干扰RNA(siRNA),实验组加入100 nmol·L-1针对人VEGFR2的siRNA。用liposome转染阴性对照组和实验组的siRNA至原代HUVECs中,以流式细胞术测定细胞的纯度;以实时荧光定量聚合酶链式反应检测siRNA的基因沉默效率;划痕法检测细胞迁移距离;小管形成法检测细胞血管生成。结果原代HUVECs纯度高达(99. 96±1. 28)%。空白组、阴性对照组和实验组的基因沉默效率分别为(0. 00±3. 25)%,(5. 56±2. 32)%和(82. 41±5. 29)%;空白组、阴性对照组和实验组的迁移愈合率分别为(92. 72±2. 54)%,(85. 67±4. 32)%和(28. 21±4. 57)%;空白组、阴性对照组和实验组的总小管分支长度分别为(4639. 87±600. 35),(4441. 92±584. 82)和(791. 59±106. 29)μm。上述指标:实验组与空白组和阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论 RNA干扰VEGFR2可抑制原代人脐静脉内皮细胞迁移及血管生成。

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