噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽

作者：苏林; 孔燕; 刘长征; 杨克恭; 陈松森

来源：中国医学科学院学报, 2011, (04): 351-356.

• 噬菌体表面展示文库
• 人干细胞因子
• 模拟肽
• 筛选
• 酶联免疫吸附测定法 phage-displayed peptide library
• human stem cell factor
• mimetic peptide
• bio-panning
• enzyme-linked immunosorbent assay

目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性。结果经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列。序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列。M...

• 单位
  北京市肿瘤防治研究所; 医学分子生物学国家重点实验室; 中国医学科学院北京协和医学院; 北京肿瘤医院