阿司匹林对丙酮醛引起的人血脑屏障内皮细胞损伤的影响

作者：庄世芳^*; 王艳华

来源：海南医学, 2020, 31(02): 141-145.

• 阿司匹林
• 人血脑屏障内皮细胞
• 丙酮醛
• 活性氧
• 自噬
• 凋亡

目的探讨阿司匹林对丙酮醛(MGO)引起的人血脑屏障内皮细胞(hCMEC/D3)损伤的影响及调控机制。方法首先,观察WST-1试剂盒检测含不同浓度MGO (0.1～10 mmol/L)或阿司匹林(0.1～1 mmol/L)的培养液处理24 h对细胞活力的影响。然后,将实验细胞分组处理:对照组(培养液加入对应体积的DMSO或去离子水)、MGO处理组(培养液加入1 mmol/L的MGO)、MGO联合阿司匹林处理组(培养液加入1 mmol/L的MGO和不同浓度的阿司匹林),培养24 h后,试剂盒检测细胞活力、Caspase-3活性、活性氧(ROS)水平,Western blot检测LC3Ⅰ、LC3Ⅱ表达情况。结果不同浓度的MGO处理细胞24 h后,细胞活力随MGO浓度提高而逐步降低,当MGO浓度达到1 mmol/L时,细胞活力为(79.72±5.01)%,与0 mmol/L MGO组的(100.00±2.45)%比较差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度的阿司匹林处理细胞24 h后,阿司匹林浓度依赖性降低细胞活力,当阿司匹林浓度为0.5 mmol/L或1 mmol/L时,细胞活力为分别为(87.72±3.36)%和(81.55±2.85)%,与0 mmol/L阿司匹林组相比,差异有统计学意义(P<0.05);MGO联合阿司匹林处理进一步降低细胞活力,MGO联合0.5 mmol/L或1 mmol/L阿司匹林处理组,细胞活力分别为(67.33±6.47)%和(59.40±5.12)%,与MGO处理组的(80.16±3.50)%相比,差异均有统计学意义(P<0.05);MGO处理组的Caspase-3活性为(112.38±4.62)%,较对照组的(100.00±2.32)%有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);MGO联合1 mmol/L阿司匹林处理组,Caspase-3活性为(133.13±7.23)%,与对照组或MGO处理组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,MGO处理组ROS阳性的细胞数明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);MGO联合不同浓度阿司匹林处理组ROS阳性的细胞数较MGO处理组均进一步增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,MGO处理组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达比值上升至4.7倍,然而阿司匹林能够完全抑制MGO引起的LC3Ⅱ表达增加。结论阿司匹林加重丙酮醛引起的h CMEC/D3损伤,这可能与其提高细胞氧化应激水平以及抑制细胞自噬有关。

• 单位
  西安市第九医院; 西安交通大学