番茄ACC合酶(LeACS2)在大肠杆菌中的可溶性表达

作者：李剑峰; 周惠; 徐增富; 李凝; 屈良鹄

来源：中山大学学报(自然科学版), 2005, (06): 71-74+78.

• 番茄
• ACC合酶
• GST融合表达
• 可溶性
• 纯化
• 酶活 ACC synthase
• LeACS2
• GST fusion
• good solubility
• purification
• activity assay

植物激素乙烯参与了植物生长发育等一系列生理过程,通过控制乙烯的合成进而控制经济作物的衰老和果实的成熟,给农业带来深远影响。ACC合酶是高等植物乙烯生物合成的限速酶。通过RT_PCR将番茄ACC合酶(LeACS2)cDNA克隆至大肠杆菌表达载体pET30a中并使之与GST编码序列进行融合而构建了重组表达质粒pET_LeACS2_GST。转化获得含有该重组表达质粒的大肠杆菌BL21 starTM(DE3)pLysS细胞,在IPTG的诱导下成功表达出含有LeACS2的大小约83 000的融合蛋白。该融合蛋白具有较好的可溶性。通过GST亲和层析和MonoQ阴离子交换两步纯化后的LeACS2能够催化其底...

• 单位
  中山大学; 香港科技大学