人可溶性CD105蛋白的真核表达及纯化

作者：杨希; 郎巧利; 黄楠; 余琳; 何琦琳; 葛良鹏

来源：中国生物制品学杂志, 2019, (07): 755-758.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002675

• 人可溶性CD105蛋白
• 真核表达
• 纯化

目的 建立一种简便、高效的人可溶性CD105(soluble CD105,sCD105)蛋白的真核表达及纯化方法。方法 人工合成胞外区和信号肽区域的DNA片段,在其信号肽前端加入Kozak sequence(GCACCATGG)序列,促进蛋白表达,同时在其C-末端6×His前加入K(AAG)氨基酸,促进6×His的暴露有助于后期纯化,构建真核表达质粒pcDNA3. 4-sCD105。通过瞬时转染的方法将重组质粒转染293F悬浮细胞,收集细胞上清液,利用His-trap EXCEL柱通过两步纯化法进行纯化。将纯化获得的sCD105蛋白超滤浓缩后,进行10%SDS-PAGE、Western blo...

• 单位
  重庆市畜牧科学院