应用流式细胞分选技术高效纯化大鼠视网膜神经节细胞及其鉴定

作者：杨伯齐; 高凤娟; 吴继红

来源：中国眼耳鼻喉科杂志, 2016, 16(04): 234-238.

DOI：10.14166/j.issn.1671-2420.2016.04.002

• 视网膜神经节细胞
• 细胞纯化
• 流式细胞分选
• 细胞鉴定

目的探索一种高效、稳定的纯化视网膜神经节细胞(RGC)方法。方法结合免疫抗体吸附方法,利用流式细胞仪分离新生大鼠RGC,并采用流式细胞及荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测分选RGC的纯度。结果新生SD大鼠视网膜混合细胞为(4.37±0.22)×106个/视网膜,通过流式细胞仪分离出Thy1.1阳性的RGC为(5.70±0.21)×103个/视网膜;荧光定量PCR及流式细胞分析结果均显示此方法分离的RGC细胞纯度高,可达90.11%,且纯度高低可控。结论通过流式细胞分选技术可获得较高纯度的RGC。该方法分选速度快、稳定,为深入开展RGC的体外研究,提供了一种理想的、基于流式细胞仪的细胞快速分离纯化方法。

• 单位
  复旦大学附属眼耳鼻喉科医院