摘要
目的:基于MEK1/2-ERK1/2信号通路探究五福饮延缓关节软骨退变的作用机制。方法:将大鼠按随机数字法分为3组,每组10只,分别予以生理盐水(生理盐水组)、硫酸氨基葡萄糖(硫酸氨基葡萄糖组)、五福饮(中药组)灌胃1周后取血清备用。取大鼠髋、膝关节软骨,获得并培养软骨细胞,鉴定软骨细胞。取软骨细胞分组并干预:空白组:肿瘤坏死因子(TNF-α(0μg/l)+10%生理盐水组血清;模型组:采用TNF-α(20μg/L)+10%生理盐水组血清;阳性对照组:采用TNF-α(20μg/L)+10%硫酸氨基葡萄糖组血清;中药组:采用TNF-α(20μg/L)+10%中药组血清。干预48 h后Western Blot检测软骨细胞collagen Ⅱ蛋白及MEK1/2-ERK1/2通路相关蛋白表达。结果:在倒置荧光显微镜下,软骨细胞的collagen Ⅱ广泛表达,且表达于整个细胞质。collagenⅡ的蛋白检测结果:与空白组比较,模型组中collagenⅡ的蛋白明显降低(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组和中药组软骨细胞collagenⅡ蛋白表达水平显著上调(P<0.05或P<0.01);阳性对照组与中药组间无统计学差异。MEK1/2-ERK1/2通路相关蛋白表达检测结果:与空白组比较,模型组MEK1/2、p-ERK1/2、P53蛋白表达均显著增加(P<0.01),ERK1/2蛋白表达无显著性差异;与模型组比较,阳性对照组和中药组软骨细胞MEK1/2、p-ERK1/2、P53蛋白表达都显著下降(P<0.05或P<0.01),ERK1/2蛋白表达无显著性差异。结论:五福饮含药血清能上调软骨细胞collagenⅡ蛋白表达,延缓软骨细胞凋亡,其机制可能与抑制软骨细胞MEK1/2-ERK1/2通路相关。
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单位江南医院; 浙江中医药大学; 杭州市萧山区中医院