TGF-β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用

作者：朱嘉皓; 芦婷; 钟良军^*

来源：口腔疾病防治, 2023, 31(02): 94-103.

• 转化生长因子-β1
• 牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖
• 转录因子叉头盒p3
• 白细胞介素6
• IL-35亚基
• EB病毒诱导基因3
• 牙周炎
• 人牙周膜成纤维细胞
• 细胞周期
• 免疫治疗

目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖（lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg-LPS）刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞（human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs）的调控作用。方法 获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定，通过qRT-PCR与CCK-8确定Pg-LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组：空白对照组，单纯100μg/mL Pg-LPS；低浓度组，1 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS；中浓度组，10 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS；高浓度组100 ng/mL TGF-β1+100μg/mL Pg-LPS。CCK-8检测细胞增殖情况；划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力；流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期；qRT-PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcriptional factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及EB病毒诱导基因3(Epstein-Barrvirus-induced gene 3,EBI3)mRNA表达；Western blot检测h PDLFs的Foxp3、IL-6及EBI3蛋白表达。结果 免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性；Pg-LPS浓度为100μg/mL时，hPDLFs中IL-6 mRNA表达相比空白对照组显著上升（P<0.000 1）且细胞增殖能力下降（P<0.000 1），所以选择100μg/mL Pg-LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF-β1能提高炎症状态下h PDLFs的增殖能力（P<0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力（P<0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期（P<0.000 1）;1、10、100 ng/mL TGF-β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL-6基因和蛋白表达量（P<0.000 1）,1、10 ng/mL TGF-β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量（P<0.000 1）,1、10 ng/mL TGF-β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量，10 ng/mL TGF-β1可提高Foxp3蛋白表达量（P<0.05）。结论 TGF-β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达，可能与转录因子Foxp3表达有关。

• 单位
  杭州师范大学