摘要
目的探讨TCEAL7[transcription elongation factor A(SⅡ)like 7]对结直肠癌细胞生物学功能的影响及可能的作用机制。方法应用RT-PCR检测TCEAL7在结直肠癌细胞Caco2、HT29、HCT116、SW480以及正常结直肠组织中的表达水平,筛选出低表达的细胞,将重组质粒p EZ-M98-TCEAL7及空质粒p EZ-M98通过脂质体Lipofectamine 2000转染Caco2细胞,应用RT-PCR及Western blot分别检测TCEAL7的mRNA以及蛋白表达水平;CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖活力,Transwell检测细胞迁移及侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测NF-κB及其下游靶基因蛋白表达的变化情况。结果 TCEAL7在结直肠癌细胞Caco2、HT29、HCT116、SW480中的mRNA表达量分别为(0.19±0.02)、(0.25±0.03)、(0.30±0.03)、(0.28±0.04),与正常结直肠组织(1.03±0.03)、(1.06±0.07)相比明显下降(P<0.01)。Caco2细胞转染组TCEAL7 mRNA和蛋白表达量分别为(1.08±0.13)、(1.01±0.15),均明显高于对照组[(0.43±0.20)、(0.53±0.10),P<0.01]。与对照组相比,转染组Caco2细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P<0.01),细胞凋亡增加(P<0.01),NF-κB及其下游靶基因蛋白表达改变(P<0.01)。结论 TCEAL7在结直肠癌细胞中为低表达,过表达TCEAL7能抑制Caco2细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡,可能与NF-κB信号通路有关。
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单位重庆医科大学附属第一医院