猪链球菌2型srtA基因缺失菌株的构建及生物学特性

作者：吴涛; 常海涛; 谭臣; 付婷; 司有辉; 贝为成; 陈焕春

来源：中国兽医学报, 2009, (10): 1293-1298.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2009.10.015

• 猪2型链球菌
• sortase A
• 基因缺失菌株
• 互补菌株
• 粘附 Streptocossus suis 2
• gene mutant strain
• plasmid mediated complementation strain
• addherence

扩增了srtA基因的上、下游同源臂P1和P2及其全长序列,利用温度敏感型"自杀性"质粒pSET4s构建了重组质粒pSET4s-P1-P2,并将该质粒电转化入野生菌株SS2(SC21)中,通过抗生素和温度双重筛选,得到srtA基因缺失菌株,命名SC211。同时,将srtA基因定向插入穿梭质粒pAT18,构建穿梭质粒pAT18-srtA,并将该质粒电转入srtA基因缺失菌株SC211中,通过抗生素筛选,得到质粒介导的srtA基因互补菌株SC212。通过PCR、South-ern blotting等对缺失突变菌株和互补菌株进行了鉴定。对基因缺失突变菌株和回复菌株传代培养遗传稳定性试验结果显示,缺失突...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 武汉工业学院