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摘要
目的 探究精原干细胞自我更新基因PIWIL2对口腔鳞癌细胞CAL27增殖、侵袭、迁移和裸鼠移植瘤生长的影响。方法 将口腔鳞癌细胞CAL27随机分为空白组(不作处理)、阴性对照组(转染慢病毒阴性对照病毒scramble)和PIWIL2-shRNA慢病毒组(转染PIWIL2-shRNA慢病毒)。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中PIWIL2 mRNA及蛋白表达水平，集落形成实验检测细胞增殖能力，Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力，JC-1探针检测线粒体膜电位变化，蛋白印迹法检测Ki67、血管内皮生长因子(VEGF)、E-cadherin、N-cadherin、Snail表达水平。裸鼠皮下注射慢病毒感染的CAL27细胞构建裸鼠移植瘤模型，免疫组化染色检测肿瘤组织中VEGF的表达水平，观察沉默PIWIL2对肿瘤生长的影响。结果 PIWIL2-shRNA慢病毒感染后CAL27细胞中PIWIL2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P <0.05)。与阴性对照组比较，PIWIL2-shRNA慢病毒组细胞集落形成率，侵袭细胞数，划痕愈合率，细胞中Ki67、VEGF、N-cadherin、Snail蛋白表达水平，移植瘤重量、体积，移植瘤组织中VEGF阳性表达率显著降低/减少，细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高，差异均有统计学意义(P <0.05)。JC-1探针检测结果显示，PIWIL2-shRNA慢病毒感染后细胞中红色荧光减少，绿色荧光增多。结论 沉默PIWIL2可明显抑制口腔鳞癌细胞CAL27增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤的生长。
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单位唐山市第八医院; 文安县医院; 首都医科大学附属北京口腔医院
