肾癌特异性抗原G250/MN/CAⅨ的克隆及真核表达

作者：刘颖; 于继云; 陈兴; 张贺秋; 凌世淦

来源：生物技术通讯, 2006, (04): 496-499.

• 肿瘤疫苗
• 肾细胞癌
• G250/MN/CAⅨ
• 糖基磷脂酰肌醇 tumor vaccine
• renal cell carcinoma
• G250/MN/CA Ⅸ
• GPI

目的:克隆人肾细胞癌特异性抗原G250基因,使其能够在真核细胞中表达并锚定修饰于细胞膜上。方法:提取人肾透明细胞癌细胞的总RNA,用RT-PCR扩增出G250基因,插入含有人Igκ链前导信号肽、IgG-Fc和GPI锚定信号肽基因序列的真核表达载体pCI-neo-GPI中;将构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250转染RenCa细胞,利用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光检测G250在细胞中的表达。结果:构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250经测序正确;用各种方法对筛选得到的稳定转染细胞进行检测,均可以发现G250的表达,表达部位为细胞膜。结论:克隆出人肾细胞癌特异性抗原G...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所