重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析方法的验证

作者：叶星; 宋兰兰; 赵晓瑞; 汪艳艳; 李奇蒙; 王倩; 毛晓燕^*

来源：微生物学免疫学进展, 2023, 51(05): 25-32.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2023.05.004

• 抗CD52单克隆抗体
• 人源化
• N-糖基化
• 亲水相互作用液相色谱法
• 高效液相色谱法
• 方法学验证
• 非岩藻糖
• 半乳糖:生物类似药

目的 对重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析方法亲水相互作用液相色谱法进行方法学验证，并根据多批次产品的检测结果制定质量标准。方法 参考《中华人民共和国药典》2020版(三部)通则9101中相关要求及重组人源化抗CD52单克隆抗体的制造与检定规程，对单克隆抗体N-糖糖型的分析方法进行方法学验证，验证项目包括专属性、线性、准确度、精密度、范围和耐用性。对多批次重组人源化抗CD52单克隆抗体产品(≥15批)的N-糖糖型的检测结果进行分析，计算非岩藻糖及半乳糖的相对含量，确定质量标准。结果 空白对照、阴性对照对重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析无干扰；在60～300μg的抗体含量范围内线性良好，r2≥0.99;高、中、低3种抗体含量的回收率均在96%～106%;仪器进样重复性、样品制备重复性及中间精密度均良好，峰面积百分比及保留时间的RSD均≤5%;耐用性考察时各条件下的峰面积百分比及保留时间的RSD均≤5%。对多批次重组人源化抗CD52单克隆抗体的检定结果进行统计分析，确定N-糖糖型分析的质量标准为非岩藻糖相对含量4%～20%,半乳糖相对含量≥25%。结论 方法学验证结果显示，所有考察项目中该分析方法均满足要求，可用于重组人源化抗CD52单克隆抗体N-糖糖型的分析。本实验建立的相关质量标准适用于重组人源化抗CD52单克隆抗体生产过程中N-糖糖型的质量控制，也可作为该产品未来商业化生产时放行标准的制定依据。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司