人肝脏星状细胞的一种改良分离方法

作者：王满; 郭津生; 涂传涛; 王吉耀; Scott L.Friedman

来源：复旦学报(医学版), 2008, (04): 617-620.

DOI：10.3969/j.issn.1672-8467.2008.04.029

• 人肝脏星状细胞
• 细胞分离
• 原代培养

目的建立和改良人肝脏星状细胞(human-hepatic stellate cells,hu-HSCs)分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后用Nycodenz密度梯度离心纯化hu-HSCs,台盼蓝染色法计算细胞产量和进行活力评估,α-SMA、desmin免疫荧光染色及油红O脂滴染色鉴定细胞纯度。结果分离得到的原代hu-HSCs数量高达3×106个/克肝脏,纯度达98%;细胞传代后纯度达到100%。结论改良后的方法经济、快捷、高效,细胞得率及纯度大为提高,有利于建立在原代hu-HSCs基础上的研究。

• 单位
  复旦大学