摘要
目的探讨体外弓形虫感染对大鼠肺泡巨噬细胞极化的影响。方法 Diff染色,观察弓形虫在大鼠肺泡巨噬细胞内的增殖情况。使用荧光定量PCR、Western blot和ELISA等方法,分别从mRNA水平和蛋白质水平检测弓形虫感染后M1与M2型巨噬细胞相关因子的变化。结果 Diff染色发现,弓形虫感染率在6h至36h无明显变化,在48h感染率增加(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,M1型巨噬细胞相关因子TNF-a、iNOS、CXCL10、CXCL11的mRNA在短时间内表达上调,而M2型巨噬细胞相关因子TGF-β1、ARG-1mRNA从6h开始升高,在24h达到峰值(P<0.01),CCL17、CCL18分别从24h、12h开始升高,在36h达到峰值(P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组相比,弓形虫感染12h后ARG-1表达开始升高(P<0.05);iNOS无表达。ELISA结果显示,M1型巨噬细胞相关因子TNF-a、IL-12分别在24h、6h上升到峰值(P<0.05);M2型巨噬细胞相关因子,TGF-β1从6h开始升高,在24h达到峰值(P<0.01),IL-10从24h开始升高,在36h达到顶峰,48h仍高于正常组(P<0.05)。结论弓形虫感染可以诱导大鼠巨噬细胞从静息状态极化为M2型,为机体免疫系统与弓形虫的相互作用提供了细胞研究基础。
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单位宁夏医科大学总医院; 宁夏临床病原微生物重点实验室; 宁夏医科大学