啮齿类实验动物唐菖蒲伯克霍尔德菌荧光定量PCR方法的建立及应用

作者：申屠芬琴; 刘敏; 王雪妹; 王吉星; 彭刚; 吴石爱; 李艳楠; 周倩; 张巧稚; 韩雪^*

来源：实验动物科学, 2023, 40(04): 69-72.

• 唐菖蒲伯克霍尔德菌
• 荧光PCR
• 检测
• 培养

目的 建立用于检测实验动物小鼠中唐菖蒲伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法。方法 参考团标公布的序列合成唐菖蒲伯克霍尔德氏菌引物、探针和质粒，建立荧光PCR方法，并对方法的线性、灵敏度、重复性和特异性等性能进行验证。同时应用建立的荧光PCR方法和细菌培养法对110份小鼠送检样品进行比对检测。结果 建立的唐菖蒲伯克霍尔德菌荧光PCR方法，相关系数R2可达0.998,线性良好；方法最低可检测至1×102 copies/5μL,灵敏度高；方法检测培养的唐菖蒲伯克霍尔德菌为阳性，检测金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、产酸克雷伯杆菌、绿脓杆菌和嗜肺巴斯德杆菌均为阴性，特异性良好。采集110只安乐死小鼠样品，分别进行细菌培养和荧光PCR检测，结果均为阴性，2种方法结果完全符合。结论 建立的荧光PCR方法性能良好，可用于实验动物小鼠唐菖蒲伯克霍尔德菌的检测。