伪结核棒状杆菌pld和cp40基因的克隆、序列分析及原核表达

作者：尹峥; **; 王理想; 金剑; 苏红; 付明哲; 张琪^*; 许信刚^*

来源：动物医学进展, 2020, 41(10): 25-29.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.10.005

• 伪结核棒状杆菌
• pld
• cp40
• 序列分析
• 原核表达

为了解伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,CP)陕西分离株的pld和cp40基因的遗传变异情况及制备检测抗原,利用GenBank收录CP的pld(CP001829.1)和cp40(KY041980.1)基因序列,设计合成特异性PCR引物,分别对pld和cp40基因进行扩增、序列分析和原核表达。结果表明,成功克隆了CP陕西分离株的pld和cp40全基因序列。核苷酸序列分析表明,陕西分离株pld基因与国内外已报道的伪结核棒状杆菌核苷酸同源性在98%～100%之间,cp40基因核苷酸同源性在91%～99%之间。pld和cp40基因重组原核表达菌株经IPTG诱导后可分别表达约为33 ku和41 ku的重组融合蛋白,重组蛋白均能与CP的阳性血清特异性结合。试验结果可为CP陕西分离株分子生物学特性研究提供资料,为进一步研制CP抗体ELISA检测试剂盒提供基础。

• 单位
  西北农林科技大学