磷脂酶Cε1在1型糖尿病大鼠病理性神经痛中的作用初探

作者：郭欣; 赖薇; 李艳华; 陈韵如; 叶傲然; 唐顺松; 罗静^*

来源：昆明医科大学学报, 2021, 42(02): 23-28.

• 糖尿病病理性神经痛
• 磷脂酶Cε1
• RhoA
• C3胞外酶
• 炎症因子

目的观察糖尿病病理性神经痛(DNP)大鼠脊髓磷脂酶Cε1(PLCE1)表达变化及RhoA抑制剂C3胞外酶对其活性影响,阐明PLCE1在DNP发生中的作用。方法 24只8周龄、健康雄性SD大鼠随机分为4组(n=6):正常对照组(C组),单纯RhoA抑制剂组(E组),1型糖尿病DNP模型组(DNP组)和RhoA抑制剂干预组(EG组);静脉注射1%链脲佐菌素(STZ 65 mg/kg)用于建立1型糖尿病DNP大鼠模型。对E组和EG组大鼠进行每天1次为期1周的RhoA抑制剂C3胞外酶(10 pg/10μL)鞘内注射治疗;C组和DNP组在相应时间点鞘内给予同等容积的溶剂;应用葡萄糖测定仪测定空腹血糖浓度(mmol/L);采用von Frey细丝法和冷热板测痛仪测定大鼠后爪机械刺激缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL)作为痛阈观察指标;Westernblot检测脊髓活化RhoA蛋白(RhoA-GTP)、总RhoA蛋白和PLCE1蛋白表达,用脊髓PLCE1蛋白表达水平和RhoA-GTP/总RhoA比值分别评价PLCE1和RhoA活性。ELISA检测脊髓TNF-α和IL-6含量以评价炎症反应。结果单纯应用RhoA抑制剂C3胞外酶对非DNP大鼠各项检测指标无明显影响;1型糖尿病DNP大鼠脊髓组织RhoA和PLCE1活性均显著增加(P <0.05),TNF-α和IL-6含量明显增多,差异有统计学意义(P <0.05),TWL及MWT显著降低,差异有统计学意义(P <0.05); C3胞外酶治疗在显著抑制1型糖尿病DNP大鼠脊髓组织RhoA表达(P <0.05)的同时,伴有脊髓PLCE1活性的显著降低,差异有统计学意义(P <0.05)、炎症因子TNF-α和IL-6生成的明显减少,差异有统计学意义(P <0.05),并显著缓解1型糖尿病DNP大鼠的机械痛敏和热痛敏。结论 PLCE1在1型糖尿病大鼠DNP中发挥重要作用,其活性受RhoA调控。

• 单位
  云南省第一人民医院