CHO细胞表达抗血管内皮生长因子单克隆抗体工艺优化

作者：冯炜; 史劲松^*

来源：工业微生物, 2020, 50(02): 28-35.

• 中国仓鼠卵巢细胞
• 血管内皮生长因子
• 单克隆抗体
• 培养基
• 培养条件

抗血管内皮生长因子单克隆抗体(VEGF-MA)能够抑制肿瘤生长,具有良好的市场前景。本研究利用一株重组中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)细胞株表达VEGF-MA。首先对培养基种类进行优化,筛选最优的基础培养基、补料培养基和外源添加物。研究结果表明:最有利于重组CHO细胞株表达VEGF-MA的基础培养基、补料培养基和外源添加物分别为ActiCHO P Powder CD、CD Efficient Feed C AG和Sheff-CHO Plus PF ACF。利用这一培养基配比在摇瓶和3 L发酵罐中培养重组CHO细胞,VEGF-MA产量均可达到3. 20 g/L。在3L发酵罐中进一步优化培养条件,结果表明:最优的接种密度、pH、溶解氧浓度、前期培养温度和后期培养温度分别为1. 0×106个/mL、7. 10、40%、36. 5℃和34℃,此时的VEGF-MA产量能够达到4. 10 g/L。VEGFMA质量指标均处于标准范围内:电荷异质性、糖基化水平和蛋白纯度分别为26. 1%、59. 1%和95. 1%。

• 单位
  江南大学