介导穿孔素短发夹RNA重组腺病毒的构建及其生物学作用

作者：赵莉琳; 刘阳

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (03): 291-293.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005406

• 穿孔素
• 腺病毒NK-92细胞
• 短发夹RNA perforin
• adenovirus
• NK-92 cell
• short hairpin RNA

目的:采用腺病毒介导的RNAi技术对穿孔素(PF)的功能进行体外研究,以期为深入研究PF的作用机制奠定基础。方法:构建腺病毒介导的穿孔素shRNA(Ad-shPF)。首先通过mRNA水平验证所设计的pShuttle-shPF序列的有效性,有效后包装Ad-shPF,验证其对NK-92细胞穿孔素mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:转染pShuttle-shPF(1-3)的干扰效率分别为(74.2±4.1)%、(43.2±3.2)%、(61.7±2.6)%。干扰效果明显,其中又以pShuttle-shPF1的干扰效果最佳。成功包装Ad-shPF1,感染NK-92细胞,mRNA表达水平降至对照组的32...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学附属第二医院