血清4型禽腺病毒hexon-penton串联蛋白在293T细胞中的表达

作者：庞洪泽; 吴同垒; 李蕴玉; 李佩国^*; 闫艳娟

来源：中国兽医学报, 2020, 40(06): 1109-1113.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.06.06

• 血清4型禽腺病毒
• 六邻体蛋白
• 五邻体蛋白
• 真核蛋白

为了获得293T细胞表达的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)六邻体(hexon)和五邻体(penton)的串联蛋白,采用PCR方法从因FAdV-4致死的鸡肝脏中扩增出hexon基因和penton基因,其大小分别为1 014,900 bp。使用重叠PCR将hexon基因和penton基因串联,得到hexon-penton(HP)串联基因。将HP基因导入表达质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-HP,转染293T细胞,获得HP真核蛋白。经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定结果表明,HP真核蛋白可与多抗血清发生特异性反应,蛋白质相对分子质量约为90 000,HP串联蛋白在293T细胞中获得了良好表达。研究结果表明成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-HP,并在真核细胞中获得表达,为进一步研制FAdV-4核酸疫苗奠定基础。

• 单位
  河北科技师范学院; 动物科技学院