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摘要
为表达捻转血矛线虫P450蛋白并分析其生物信息学特性,本研究利用RT-PCR扩增捻转血矛线虫P450基因,构建重组质粒p ET-P450,经双酶切鉴定,将其转化大肠杆菌后,采用SDS-PAGE检测P450蛋白的表达;利用生物信息学软件对P450蛋白的理化性质、结构特点进行分析。结果显示,正确构建了重组质粒p ET-P450且P450蛋白以包涵体的形式表达。生物信息学分析结果显示,P450蛋白分子式为C1154H1812N314O330S15,为不稳定蛋白、无跨膜区、无信号肽,是一种含较多抗原表位的亲水性蛋白,有7个B细胞抗原表位和11个T细胞抗原表位,有望用作捻转血矛线虫耐药性的诊断抗原。本研究获得了P450重组蛋白,为捻转血矛线虫耐药性快速检测方法和新药开发奠定物质基础。
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