全2?-F/OMe-siRNA的设计合成及其新型混合脂材纳米制剂抗肝癌活性评价

作者：高宇睛; 王玺贤; 潘宇飞; 汪全鑫; 朱月洁; 潘德林^*; 关注; 杨振军^*

来源：药学学报, 2023, 58(06): 1634-1640.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2022-1345

• 小干扰RNA
• 全2?-修饰
• 抗肝癌
• Ago2
• DNCA/CLD

本文设计合成了多条全2?-F/OMe修饰的抗肝癌siRNA,并在细胞水平进行活性评价,探究2?-F/OMe修饰的位置差异对siRNA活性的影响。使用K&A DNA/RNA H-8合成仪合成全2?-F/OMe修饰siRNA,利用中性胞苷脂材DNCA混合阳离子脂材CLD包载递送siRNA入胞。通过RT-qPCR实验检测Huh-7和HepG2细胞的靶基因沉默活性, CCK-8实验检测Huh-7和HepG2细胞增殖活力, RNA结合蛋白免疫沉淀及RT-qPCR实验检测siRNA载入Ago2蛋白的情况,流式细胞术检测药物摄取和细胞凋亡, Western blot实验检测PLK1蛋白的表达。部分全2?-F/OMe修饰siRNA增强了与Ago2蛋白的结合,进而增强了基因沉默活性及肝癌细胞增殖抑制活性。此外,多数siRNA修饰物制剂的Huh-7细胞摄取率提高,更大幅度下调PLK1蛋白,诱导更多Huh-7细胞凋亡,其中siPLK1A3最优。以上结果为进一步研究siRNA修饰模式及研发抗肝癌新型制剂提供了工作基础。

• 单位
  成都中医药大学; 天然药物与仿生药物国家重点实验室