摘要
目的探究ROS/p38MAPK通路对PKC诱导人结直肠癌SW480细胞MMP-9表达及细胞侵袭的作用机制。方法利用蛋白激酶C(PKC)激动剂12-O-十四烷基酚-13-乙酸酯(TPA)处理人结直肠癌SW480细胞,并且进行PKC抑制剂/ROS抑制剂/p38抑制剂干扰。通过Western blot法检测MMP-9、p38/p-p38以及核内p65蛋白表达水平;激光共聚焦检测细胞内ROS含量;明胶酶谱法检测MMP-9细胞外分泌情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果 TPA增加细胞内ROS的生成和p38的磷酸化,可诱导p65和MMP-9的表达上调;而预处理PKC抑制剂/ROS抑制剂/p38抑制剂能够阻断TPA诱导的ROS生成和p38磷酸化,下调核内p65蛋白的表达,进而使TPA诱导的SW480细胞MMP-9表达及细胞侵袭能力显著下降。结论ROS介导p38MAPK信号通路调控转录因子NF-κB,促进结直肠癌细胞MMP-9表达及侵袭发生;PKC诱导SW480细胞侵袭中的潜在作用机制,为结直肠癌转移研究提供新的思路。
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单位中心实验室; 大连大学附属新华医院