摘要
目的研究雷公藤多甙(TWP)对脂多糖(LPS)诱导的胰腺腺泡细胞(AR42J)炎症损伤的作用并初步探讨其机制。方法采用MTT法测定不同浓度的TWP对AR42J细胞活性的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L TWP作用24 h后AR42J细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-1β蛋白表达水平,实时荧光定量(RT-qPCR)法测定2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L TWP作用24 h后AR42J细胞中核转录因子(NF)-κB、Toll样受体(TLR)4和miR-146a表达水平。结果 AR42J细胞经10μmol/L TWP处理24 h后,仍保持较高活性,为防止细胞活力过低导致后续实验出现假阳性结果,选取2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L TWP进行。与对照组相比,LPS组TNF-α、IL-6、IL-1β、miR-146a、NF-κB p65、TLR4表达水平显著升高(P<0.05);与LPS组相比,L-TWP+LPS组、M-TWP+LPS组、H-TWP+LPS组、DXM+LPS组TNF-α蛋白、IL-6蛋白、IL-1β蛋白、NF-κB p65蛋白、TLR4蛋白表达水平显著降低(P<0.05),miR-146a表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论 TWP可能通过上调miR-146a表达水平抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而降低LPS诱导的AR42J细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白表达水平。
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单位儋州市人民医院