基于线粒体DNA cox2基因的甜菜霜霉病的分子检测技术

作者：李京; 张祥林; 王翀; 李亚伟; 张小菊

来源：新疆农业科学, 2016, 53(05): 857-865.

DOI：10.6048/j.issn.1001-4330.2016.05.011

• 甜菜霜霉病
• mt DNA
• 特异性引物
• 系统发育关系

【目的】建立甜菜霜霉病菌检测技术。【方法】利用等位基因特异性PCR(AS-PCR)的原理,依据线粒体DNA(mt DNA)基因cytochrome c oxidase subunit II(cox2),运用卵菌门通用引物(P-COX2F/PCOX2R)扩增甜菜霜霉病菌及6种对照霜霉病菌的目的片段,测序,比对,根据等位基因特异PCR(AS-PCR)原理设计测甜菜霜霉病菌的特异性引物,并对该引物的特异性、灵敏度加以验证;分析同源性,构建系统发育树。【结果】通用引物扩增的甜菜霜霉病菌以及其他霜霉病菌片段大小约为630 bp,经比对,该霜霉病菌与Peronospora schachtii同源性达99%,并设计出特异性引物BSP-F/BSP-R,特异性引物BSP-F/BSP-R可以检测到10-2ng/μL的模板浓度。【结论】建立的甜菜霜霉病菌快速检测技术,为口岸的进出境监测与检测提供了科学依据。

• 单位
  新疆出入境检验检疫局; 新疆农业大学