纳米银体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究

作者:楚品品; 蒋智勇; 李春玲; 勾红潮; 李艳; 蔡汝健
来源:中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4356-4363.
DOI:10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.11.026

摘要

【目的】研究纳米银(silver nanoparticles, AgNPs)体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的作用,并初步分析其抗病毒作用机制,为PRRSV的防控提供新思路。【方法】使用0.1875、0.375、0.75、1.5、3、6、12μg/mL AgNPs处理Marc145细胞,采用CCK-8试剂盒评估AgNPs对Marc145细胞毒性,确定其安全浓度。通过显微观察、间接免疫荧光试验、病毒滴度测定、实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs体外抗PRRSV感染Marc145细胞的效果。通过间接免疫荧光试验和实时荧光定量RT-PCR方法评估AgNPs对PRRSV的直接灭活效果。通过实时荧光定量RT-PCR方法分析AgNPs对不同感染复数(multiplicity of infection, MOI)PRRSV(0.0001~0.1)黏附和入侵Marc145细胞的影响,以及PRRSV感染Marc145细胞3、6、12、18和24 h后加入AgNPs对Marc145细胞增殖的影响。【结果】AgNPs对Marc145细胞的最大安全浓度为1.5μg/mL,0.375、0.75、1.5μg/mL AgNPs均具有良好的体外抗PRRSV活性,0.375、0.75、1.5μg/mL AgNPs均对PRRSV起一定灭活作用。AgNPs对不同MOI的毒株黏附和入侵Marc145细胞均有一定抑制作用,且不同时间(3、6、12、18、24 h)加入AgNPs对PRRSV增殖均有一定抑制作用。【结论】AgNPs具有良好的体外抗PRRSV活性,体外抗PRRSV的作用机制包括直接灭活以及抑制病毒的黏附、入侵和增殖过程。

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