SPG血清白蛋白结合区和RSV的G蛋白片段融合蛋白的构建和表达

作者：宋艳; 王希良

来源：免疫学杂志, 2009, 25(06): 722-724.

• 呼吸道合胞病毒
• SPG血清白蛋白结合区
• 原核表达
• 蛋白纯化 respiratory syncytial virus
• serum albumin-binding region of streptococcal protein
• prokaryotic expression
• protein purification

目的构建表达呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白片段(来自130-230氨基酸)和来自链球菌蛋白G(SPG)血清白蛋白结合区(BB)的原核表达质粒,寻找适合的表达和纯化条件,获得融合表达蛋白,为进行体内外实验检测奠定基础.方法利用PCR技术,通过提取病毒cDNA和链球菌基因组DNA为模板扩增目的片段,构建融合表达质粒PET32a(BBG2Na)。转化宿主菌E. coli Bl21(DE3)进行表达,并采用亲和层析纯化目的蛋白。结果Thx-G2Na-BB在E. coli BL21(DE3)中可获得高效表达,表达量可达菌体蛋白的68.3%,并以可溶性的形式表达,纯化后的目的蛋白纯度可达90%。结论实现T...

• 单位
  军事医学科学院; 北华大学