牛病毒性腹泻病毒牦牛分离株E0基因的克隆表达

作者：叶成玉; 王光华; 蔡其刚; 王戈平; 陆艳; 张芳芳; 马利青; 周继章

来源：动物医学进展, 2012, (09): 16-20.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2012.09.003

• 牛病毒性腹泻病毒
• E0基因
• 原核表达
• 抗原性 BVDV
• E0 gene
• prokaryotic expression
• antigencity

将青海牦牛牛病毒性腹泻病毒(BVDV)青海泽库(QHZK)株的E0基因亚克隆入原核表达载体pET-32(a),构建了重组表达载体pET-32(a)-E0,然后用重组质粒转化Rosetta(DE3)感受态细胞,并利用IPTG诱导蛋白表达。表达的蛋白用His-Band镍柱进行亲合层析纯化,Western blot鉴定表达蛋白。结果显示,E0基因可在大肠埃希菌中获得表达,表达产物的分子质量约为44ku,与预期的蛋白分子质量大小一致;Western blot分析表明,该蛋白可以与BVDV标准阳性血清产生特异性结合反应。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 青海省畜牧兽医科学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所