线虫烯脂酰CoA水合酶的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析

作者：李志杰; 张凯; 翟宇佳; 周强军; 耿运琪; 孙飞

来源：生物物理学报, 2010, 26(01): 37-48.

• 脂肪酸β-氧化循环
• 烯脂酰CoA水合酶
• 线虫
• 多角度静态光散射
• 三晶 fatty acid β-oxidation spiral
• enoyl-CoA hydratase
• Caenorhabditis elegans
• size exclusion chromatography with multi-angle light scattering detection
• tricrystal

生物体β-氧化循环是脂肪酸氧化分解的主要途径,许多代谢疾病都与其密切相关。线虫β-氧化循环与人类相似,但与其相关的研究报道却很少。线虫基因C32E8.9编码的蛋白被WormBase命名为烯脂酰CoA水合酶(WormBase ID:CE29693),被推测具有催化β-氧化循环第二步反应的功能。作者将C32E8.9基因克隆到原核表达载体上,在大肠杆菌中获得高效表达,并分别纯化了母体蛋白以及硒代蛋白衍生物。多角度静态光散射实验表明该蛋白的聚合状态为三聚体。该蛋白在沉淀剂2-甲基-2,4-戊二醇的作用下形成可供衍射分析的六棱柱形状晶体,空间群为P21,晶胞参数为a=79.0,b=82.4,c=79...

• 单位
  生物大分子国家重点实验室; 中国科学院生物物理研究所