摘要
目的 通过生物信息学方法探究TMEM33在宫颈癌组织中的表达及其与预后的关系,观察TMEM33经RNA干扰后对宫颈癌细胞生长的影响。方法 应用GEPIA(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库筛选出与宫颈癌相关的TMEM33基因,设计两条特异siRNA序列,进行RNA干扰实验。实验分为3组:siTMEM33#1干扰组、siTMEM33#2干扰组、阴性对照组(非特异性siRNA)。Western blot法检测siRNA干扰后宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达,CCK-8法检测SiHa/HeLa细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化,Western blot法检测细胞凋亡关键基因BCL-2、Bax及细胞周期蛋白CyclinD1、P21的表达变化。结果与阴性对照组相比,特异性siRNA显著下调宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达(P<0.05);宫颈癌细胞增殖明显受抑,细胞凋亡显著增加,细胞周期S时相明显减少(P<0.05);细胞凋亡关键基因BCL-2表达下降、Bax表达上升,细胞周期蛋白CyclinD1降低、P21升高(P<0.05)。结论 TMEM33经RNA干扰后,能明显抑制宫颈癌细胞生长。影响宫颈癌细胞周期、调节细胞凋亡与细胞周期相关蛋白的表达可能是TMEM33促进宫颈癌细胞生长的作用机制。
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单位复旦大学附属妇产科医院