结核分枝杆菌高特异性MB-PCR体系优化及荧光检测研究

作者：陈庆海; 边志衡; 张雪; 匡红; 敖琳; 府伟灵

来源：中华医院感染学杂志, 2008, (03): 312-315.

• 分子信标探针
• 结核分枝杆菌
• 荧光分光光度仪
• 聚合酶链反应

目的设计结核分枝杆菌高特异性分子信标探针及优化TB-MB-PCR体系,尝试运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号。方法运用软件Beacon designer设计分子信标探针,优化TB-MB-PCR反应体系各组份浓度,运用荧光分光光度计观测反应后的荧光信号。结果优化后的MgCl2、引物、dNTP以及MB在PCR反应体系中的最佳终浓度分别为4mmol/L、0.04μmol/L、0.2mmol/L以及0.04~0.05μmol/L;3种稀释标本TB-MB-PCR阳性产物、TB-MB-PCR阴性产物;TB-PCR阴性产物(空白对照)的荧光信号差异明显。结论高特异性分子信标探针设计较理想、优化后的TB-MB-PCR反应体系灵敏性、特异性好;荧光分光光度仪可直接检测反应产物,有简单、灵敏、准确等优点。

• 单位
  第三军医大学西南医院