自拟益气化瘀补肾方对膝骨关节炎小鼠β-catenin信号通路的影响

作者：熊振飞; 汤样华; 王乾; 黄晨; 辛大伟; 唐德志^*

来源：上海中医药杂志, 2021, 55(09): 86-90.

DOI：10.16305/j.1007-1334.2021.2007120

• 膝骨关节炎
• 分子机制
• β-catenin
• 益气化瘀补肾方
• 模型小鼠
• 中药研究

目的研究自拟益气化瘀补肾方对β-catenin信号通路的影响及其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法通过改良Hulth法切开小鼠右膝部内侧皮肤,切断内侧副韧带,切除内侧半月板,并切断前交叉韧带,造成小鼠膝骨关节炎模型,分为模型组和自拟益气化瘀补肾方组。假手术组单纯切开小鼠右膝部内侧皮肤。造模2个月后给予自拟益气化瘀补肾方灌胃,治疗2个月。采用Micro-CT扫描小鼠膝关节,ABH/OG染色观察小鼠膝关节软骨细胞变化,免疫组化染色观察小鼠膝关节β-catenin、MMP-13、Col X表达,RT-PCR检测Col X、MMP-9、MMP-13和OC基因表达。结果 (1)Micro-CT检测发现,与假手术组比较,模型组膝关节周围骨赘形成增加,自拟益气化瘀补肾方组膝关节周围骨赘形成少于模型组。(2)ABH/OG染色发现,假手术组关节软骨表面光滑,表浅层、移行层、放射层和钙化层4层结构清晰可辨,软骨细胞呈柱状排列,无软骨细胞巢聚;模型组关节软骨组织表浅层细胞数量减少,移行层和放射层见到大量软骨细胞巢聚,潮线前移,出现双潮线;自拟益气化瘀补肾方组关节软骨组织形态较模型组明显改善。(3)β-catenin免疫组化染色结果显示,与假手术组比较,模型组关节软骨细胞β-catenin蛋白表达显著增加,自拟益气化瘀补肾方组关节软骨细胞β-catenin表达比模型组显著减少(P<0.05);免疫组化染色结果还发现,与假手术组比较,模型组关节软骨组织Col X、MMP-13蛋白表达显著增加(P<0.05)。与模型组比较,自拟益气化瘀补肾方组关节软骨组织Col X、MMP-13蛋白表达显著减少(P<0.05)。(4)RT-PCR反应检测结果显示,与假手术组比较,模型组关节软骨组织Col X、MMP-9、MMP-13和OC基因表达显著增加(P<0.05)。与模型组比较,自拟益气化瘀补肾方组关节软骨组织中Col X、MMP-9、MMP-13和OC基因表达显著减少(P<0.05)。结论自拟益气化瘀补肾方可以治疗膝骨关节炎,其作用机制可能是通过降低β-catenin的表达而实现。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院; 杭州市萧山区中医院; 上海中医药大学