p53介导的铁死亡在调控人结直肠癌顺铂耐药中的作用及机制

作者：牛爽; 何忠时; 曾炼; 胡鹏超^*; 王静^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(01): 9-19.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2023.01.002

• 结直肠癌
• 铁死亡
• 顺铂
• 耐药性
• p53蛋白

目的：探究p53介导的铁死亡在调控人结直肠癌顺铂耐药中的作用及机制。方法：采用人结肠腺癌细胞株LOVO反复短期暴露于顺铂并逐渐增加顺铂浓度的方法建立耐顺铂细胞株LOVO/DDP。顺铂单独及联合铁死亡激活剂erastin/铁死亡抑制剂liproxstatin-1处理LOVO和LOVO/DDP细胞。CCK-8法测定不同处理组的细胞活力，计算顺铂的IC50值；RT-qPCR检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平；采用活性氧（reactive oxygen species,ROS）绿色荧光探针2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate, DCFH-DA）、线粒体红色荧光探针MitoTracker Red CMXRos及线粒体JC-1检测试剂盒测定不同处理组中细胞内ROS和线粒体功能；采用亚铁离子荧光探针FerrOrange检测细胞内亚铁离子含量；Western blot检测不同处理组中溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11, SLC7A11)重组蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4, GPX4)和p53的蛋白表达水平。结果：顺铂单独处理后，LOVO/DDP细胞活力较LOVO细胞下降平缓，ROS增加和线粒体损伤不显著，促进铁死亡的基因低表达，抑制铁死亡的基因高表达，SLC7A11和GPX4的蛋白表达略下降，p53表达显著升高（P<0.05）；联合铁死亡激活剂剂erastin组LOVO/DDP细胞活力较LOVO细胞显著下降，ROS和亚铁离子水平显著增加，诱导线粒体功能障碍，SLC7A11和GPX4的表达显著下降，p53的表达显著增加（P<0.05）；联合铁死亡抑制剂liproxstatin-1可逆转上述结果。结论：p53介导的铁死亡可增强结直肠癌细胞对顺铂的敏感性。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 锦州医科大学; 襄阳市第一人民医院; 湖北医药学院