金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立及应用

作者：张小雨; 王雯雯; 马臣杰; 吴晓玲; 邓光存^*

来源：农业生物技术学报, 2021, 29(09): 1845-1854.

• 环介导等温扩增(LAMP)
• 金黄色葡萄球菌
• 奶牛乳腺炎
• 检测

奶牛乳腺炎(bovine mastitis)是奶牛(Bos taurus)养殖场危害最大的常见疾病,严重影响奶牛业的健康发展,细菌感染是导致奶牛乳腺炎发生的主要原因。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起牛乳腺炎的主要致病菌之一,针对金黄色葡萄球菌的快速检测方法对实现奶牛乳腺炎的早期预防具有重要意义。环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术是一种可以在等温条件下快速检测靶标DNA的新型核酸扩增方法。本研究根据金黄色葡萄球菌nuc基因(GenBank No.DQ507379.1)设计了6条LAMP特异性引物,通过优化反应体系成功建立了一种金黄色葡萄球菌LAMP检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度及临床检测效果进行了评价。结果表明,所建立的金黄色葡萄球菌LAMP检测方法特异性良好、最低检测限为2.7×101 copies/μL,其灵敏度是普通PCR方法的100倍。该方法操作简单、反应快速、特异性强且灵敏度高,可用于奶牛养殖场金黄色葡萄球菌的快速检测,也可为其他病原菌感染引发的奶牛乳腺炎早期诊断方法提供参考。

• 单位
  宁夏大学; 生命科学学院