丙泊酚通过miR-802/PTCH1/SHH通路抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭的研究

作者：罗江辉; 毛远舟^*; 张可贤; 邹江

来源：中国医院用药评价与分析, 2022, 22(10): 1164-1171.

DOI：10.14009/j.issn.1672-2124.2022.10.003

• 丙泊酚
• 宫颈癌
• miR-802
• PTCH1
• SHH

目的：探讨丙泊酚通过miR-802/PTCH1/SHH通路对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响。方法：使用不同浓度丙泊酚处理人宫颈癌细胞HeLa为丙泊酚组，使用二甲基亚砜处理细胞为对照组。采用噻唑蓝实验和Transwell实验分别检测HeLa细胞活力、侵袭和迁移能力；通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-802和PTCH1 mRNA的表达水平。通过生物信息学分析以及双荧光素酶报告基因系统验证了miR-802和PTCH1之间的靶关系。分别将NC mimic、miR-802 mimic转染至HeLa细胞中，命名为NC mimic组、miR-802 mimic组。将NC inhibitor、miR-802 inhibitor、Vector和pcDNA-PTCH1转染至10μg/mL丙泊酚处理的HeLa细胞中，分别命名为丙泊酚+NC inhibitor组、丙泊酚+miR-802 inhibitor组、丙泊酚+Vector组和丙泊酚+pcDNA-PTCH1组，检测细胞活力、侵袭和迁移能力。采用蛋白质印迹法检测PTCH1和Gli1蛋白表达水平。结果：与对照组比较，丙泊酚组HeLa细胞活力、侵袭和迁移能力均显著降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC mimic组比较，miR-802 mimic组HeLa细胞中的miR-802表达水平显著升高，细胞活力降低，侵袭和迁移能力降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，丙泊酚+NC inhibitor组HeLa细胞中miR-802表达水平显著升高；与丙泊酚+NC inhibitor组比较，丙泊酚+miR-802 inhibitor组HeLa细胞中miR-802表达水平显著降低，细胞活力显著增强，侵袭和迁移能力显著增强，上述差异均有统计学意义(P<0.05)。PTCH1被鉴定为miR-802的靶基因。与NC inhibitor组比较，miR-802 inhibitor组细胞中PTCH1 mRNA和蛋白水平显著升高，Gli1蛋白表达水平升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达PTCH1逆转了miR-802和丙泊酚诱导的对HeLa细胞活力、迁移和侵袭能力的抑制。结论：丙泊酚通过调节miR-802/PTCH1/SHH通路来抑制宫颈癌细胞的迁移和侵袭。

• 单位
  四川省肿瘤医院