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摘要
目的 探究金银花提取物对抗CD19 CAR-T细胞肿瘤杀伤活性以及细胞因子释放的影响。方法 利用抗CD19 CAR-T细胞与肿瘤细胞Raji细胞(或Raji-Luc细胞)共培养体系，通过荧光素酶与凋亡检测法测定对照组与金银花处理组的抗CD19 CAR-T细胞的杀伤效率；采用CFSE染色法检测增殖能力，并通过流式细胞术测定细胞因子的释放水平与PD-1蛋白的表达水平。结果 T细胞转导组CD19 CAR分子的表达率为65.7%，表明抗CD19 CAR-T细胞制备成功。10 mg·mL-1金银花提取物与抗CD19 CAR-T细胞联合组杀伤Raji细胞的效力最佳，且优于CD19 CAR-T细胞组、金银花与未转导T细胞联合组、未转导T细胞组与金银花处理组。并且在1∶2、1∶4、1∶8与1∶16效靶比条件下，金银花提取物均可以增强抗CD19 CAR-T细胞的肿瘤杀伤能力，改善抗CD19 CAR-T细胞的增殖能力，促进Granzyme B的分泌而抑制IFN-γ与IL-10的释放。进一步研究发现，金银花提取物可以抑制CD19 CAR-T细胞表达PD-1蛋白。结论 10 mg·mL-1的金银花提取物可以有效提高抗CD19 CAR-T细胞体外杀伤肿瘤的效力，促进抗CD19 CAR-T细胞增殖，并特异性调节细胞因子的释放，下调PD-1蛋白的表达。
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