本发明公开一种非特异性过氧合酶的重组菌株及其构建方法和应用,属于酶工程应用领域。所述重组菌株以pPICZαA质粒为出发载体,以毕赤酵母作为宿主菌,表达非特异性过氧合酶GmaUPO;所述非特异性过氧合酶GmaUPO的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过基因工程技术,成功在毕赤酵母中异源表达了GmaUPO,并优化了发酵条件,进行了重组酶的催化应用的初步研究,旨在扩大UPO生物酶的资源库,以替代现有的化学法进行芳香烃的高效清洁生产,同时为其催化应用提供一定的研究基础。