HIF-1α条件性基因敲除嵌合体小鼠的获得

作者：赵玲; 杜晓兰; 苏楠; 宋瑞华; 何启芬; 李福兵; 戚华兵; 陈林

来源：第三军医大学学报, 2007, (14): 1361-1363.

• 低氧诱导因子-1α
• 条件性基因敲除
• 同源重组
• 胚胎干细胞
• Cre/loxP系统

目的应用Cre/loxP系统建立HIF-1α条件性基因敲除小鼠模型。方法电击法将构建好的HIF-1α条件性基因敲除载体转染入小鼠ES细胞,用G418与Ganciclovir对转染的ES细胞进行正负筛选,经Southern杂交鉴定得到阳性ES细胞克隆后,将已发生正确重组的ES细胞显微注射入小鼠囊胚腔,对子代鼠进行基因型鉴定。结果经G418与Gan-ciclovir筛选培养得到490个阳性克隆,用5′端探针进行Southern杂交鉴定获得1株发生同源重组的ES细胞克隆,经显微注射,得到5只由基因敲除ES细胞和供体囊胚细胞共同发育而来的嵌合体小鼠。结论成功得到基于Cre/loxP系统的HIF-1α条件性基因敲除嵌合体小鼠模型。

• 单位
  第三军医大学大坪医院