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摘要
本研究以一株鸡白痢沙门氏菌噬菌体Pu29为研究对象，全面分析其生物学及基因组特性，将其作为识别元件，建立基于噬菌体Pu29的沙门氏菌磁分离富集技术。该噬菌体属于轮状病毒（Roufvirus）属，具有二十面体的头部和不可收缩的长尾部。Pu29具有较宽的宿主谱，在15 min对宿主细胞的吸附率为88.67%，潜伏期为30 min，爆发期为180 min，爆发量为115.74 PFU/cell。同时Pu29具有较好的耐热性（30～60℃）和pH耐受性（pH 4～11）。Pu29基因组由45，715 bp (46.08% GC含量)和81个开放阅读框组成，包括18个具有已知功能的阅读框，不携带编码毒性或抗性因子的基因。通过酰胺反应将噬菌体Pu29与羧基化的纳米磁珠偶联制备探针PhagePu29-MBs。使用25 μg探针与沙门氏菌在37℃下孵育20 min时，对沙门氏菌的捕获率最高可达到83.93%，最低捕获细菌浓度为45 CFU/mL。采用透射电镜观察到PhagePu29-MBs能够特异性的捕获沙门氏菌。在加标样品中，PhagePu29-MBs分离富集沙门氏菌的捕获率最高能达到92.92%。该方法分离富集沙门氏菌的时间大约为30 min。因此，本研究基于噬菌体Pu29建立了一种快速，特异性强的沙门氏菌磁分离方法，可为开发基于噬菌体快速分离富集食源性病原菌奠定研究基础。
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