CDC6 siRNA对肝癌干细胞HepG2-CSCs增殖和迁移的影响

作者：牛广旭^*; 郭晓娟; 杨建华; 刘小慧

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(12): 1649-1654.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.12.003

• 肝癌干细胞
• CDC6
• 细胞增殖
• 细胞迁移

目的观察细胞分裂周期蛋白6(cell division cycle 6,CDC6)在肝癌干细胞(Hep G2-CSCs)中的表达,并探讨CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs增殖和迁移的影响。方法通过免疫磁珠分选法从肝癌细胞株Hep G2中分离肝癌干细胞Hep G2-CSCs,并通过流式细胞术鉴定细胞免疫表型,Western blot法检测Hep G2-CSCs中CDC6蛋白的表达水平。将Hep G2-CSCs分为两组,分别为对照siRNA组和CDC6 siRNA组,其中CDC6 siRNA组和对照siRNA组分别为通过lipofectamine 2000转染CDC6 siRNA和对照siRNA的Hep G2-CSCs细胞,平板克隆形成实验和Transwell法分别检测CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs克隆形成和迁移的影响;Western blot检测CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs CDC6、wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响。结果流式细胞术检测结果显示,CD133在Hep G2和Hep G2-CSCs中阳性率分别为(0. 54±0. 16)%和(98. 82±0. 95)%;Western blot结果显示CDC6蛋白在Hep G2-CSCs细胞中的表达显著高于Hep G2细胞(P <0. 01);克隆形成实验结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组细胞克隆形成率显著降低(P <0. 01);Transwell检测结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组Hep G2-CSCs细胞迁移能力显著降低(P <0. 01);Western blot结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组CDC6、wnt3a和β-catenin蛋白表达显著降低(P <0. 01)。结论 CDC6在Hep G2-CSCs中高表达,CDC6siRNA能够抑制wnt3a和β-catenin蛋白表达,抑制Hep G2-CSCs克隆形成和迁移。

• 单位
  邯郸市中心医院