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摘要
目的:观察鼻咽癌病人树突状细胞(DC)经体外分离诱导分化后表型变化和呈递功能的情况。方法:在体外分离并诱导成熟HLA-A2基因型鼻咽癌病人自身的DC,运用流式细胞仪检测DC的表型变化,然后分别负载EB病毒抗原LMP-2的HLA-A2限制型两个表位肽段CLGGLLTMV(CLG)和LTAGFIFL(LTA),诱导自身的CD8+T细胞。培养两周后,运用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测经DC诱导后CD8+T细胞的免疫应答情况。结果:分离鼻咽癌患者外周血DC,培养7d后用流式细胞仪检测DC的各项表型:CD80、CD86、CD83、HLA-DR等,呈现分化成熟的表型特征。上述各种表型的细胞百分率分别为(33·92±21·42)%、(90·20±12·10)%、(32·89±23·47)%、(90·37±12·82)%,并且与正常人的DC的表达无明显差异。培养成熟的DC呈递肽段CLG及LTA给自身CD8+T细胞,T细胞识别肽段并能应答的细胞数增加,呈递前分别为(2·67±1·97)2×104CD8+T细胞和(5·33±1·86)2×104CD8+T细胞,呈递后为(42·67±33·79)2×104CD8+T细胞和(25·67±18·25)2×104CD8+T细胞,呈递前、后比较差异有统计学意义(P<0·05)。同时与正常T细胞的应答能力无明显差别。结论:鼻咽癌病人外周血DC可经外周血分离培养,诱导扩增后能分化成熟并能有效呈递肿瘤抗原肽段,产生特异性CTL,对鼻咽癌病人的免疫治疗具有潜在的应用价值。
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