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摘要
研究了纳米金标黄曲霉毒素B1单克隆抗体(McAb)探针的制备及其标记机理,确定了稳定标记5种不同粒径金溶胶(10.767.4 nm)所需McAb的最适质量浓度,分别为0.07,0.051,0.033,0.019,0.012mg/mL,作用时间为5 min,pH为7.4.对金标探针复合物进行透射电镜、红外光谱和免疫反应性鉴定的结果表明,与未标记抗体相比,抗体探针的免疫亲和常数、效价和常温贮藏稳定性得到了明显提高.通过荧光光谱和圆二色谱研究纳米金与AFB1单抗McAb的相互作用机理,发现纳米金对McAb产生静态猝灭,猝灭的速率常数随着温度升高而降低.确定了结合位点数和结合常数.结果显示,表明McAb的色氨酸残基与纳米金颗粒之间发生了F rster偶极-偶极无辐射能量转移.初步确定反应前后McAb构象组成发生了变化是McAb探针亲和力和稳定性提高的原因.
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