摘要
目的 探讨长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)调控miR-424抑制宫颈癌细胞增殖的机制。方法 预测筛选靶向GAS5的miRNA,用双荧光素酶法检测其荧光素酶活性。分析宫颈癌组织和正常宫颈组织GAS5和miR-424 mRNA水平,及其与患者临床病理特征的关系。检测Ect1/E6E7细胞和HeLa细胞GAS5和miR-424 mRNA水平。将miR-NC、GAS5 RNAi和pCDNA3.0-HA-GAS5质粒转染到HeLa细胞,MTT法及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,Western blotting法检测细胞Dnmts、EZH2和Akt3蛋白表达水平。结果 miR-424-mimic可明显降低GAS5-WT荧光素酶活性(P<0.05),表明GAS5与miR-424存在靶向调节作用。宫颈癌组织GAS5、miR-424 mRNA表达低于正常宫颈组织(P<0.05);是否转移、不同FIGO分型患者间GAS5和miR-424表达存在差异(P<0.05)。HeLa细胞GAS5和miR-424 mRNA表达低于Ect1/E6E7细胞(P<0.05)。与阴性对照组比较,HeLa细胞GAS5、miR-424 mRNA、细胞凋亡率、Dnmts和EZH2表达GAS5 RNAi组降低,GAS5质粒组增加;细胞增殖率和Akt3表达GAS5 RNAi组增加,GAS5质粒组降低(P<0.05)。结论 lncRNA GAS5通过靶向调控miR-424的表达抑制宫颈癌HeLa细胞增殖。
-
单位香港大学深圳医院; 南方医科大学深圳医院